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胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結血液的液體部分,不含細胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細胞生長至關重要的營養和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養細胞的維持和生長至關重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質和激素。FBS應用廣泛。FBS的主要用途之一是在真核細胞培養中,其濃度高達20%甚至更高,它提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養素和生長因子。然而,需要注意的是,人類細胞培養物中的FBS可能會引入研究成果。用人類血清培養的人類...
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電泳是分離蛋白質和其他物質如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有機化合物甚至無機離子的主要技術。目前的大部分電泳是將樣品分離到固定介質中的流動相中。聚丙烯酰胺凝膠是主要介質之一。它是一種多孔凝膠,其孔徑接近蛋白質分子的大小,提高了蛋白質的分辨率。此外,聚丙烯酰胺凝膠化學穩定性好,重復性強,對pH和溫度變化穩定,顏色觀察容易。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)在蛋白質分子量測定、特異性蛋白質檢測、菌種鑒定等方面具有操作簡單、重現性好等特點,因此廣為使用。電泳SDS-PAGE的工作...
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本文摘要蛋白質印跡技術(免疫印跡實驗)又稱為WesternBlot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。WesternBlot主要用于檢測或分析蛋白,應用領域集中在基因表達研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。01蛋白質印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準備:Tanon連續梯度預制膠(4-20%10孔/15孔/17孔);(4-12%10孔/15孔/17孔)TanonMops/MES電泳緩沖液(粉劑)Tanon預染蛋白MarkerTanon4×LD...
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熒光定量PCR是生物醫學中常用的檢測核酸病毒的方法之一,由此,這幾年PCR儀也成了近幾年臨床檢測和分子生物學研究的主要實驗室設備。我們知道CT值是PCR擴增曲線中的重要參數,那么CT值是什么?它與PCR擴增存在什么關系?為什么有的時候基因擴增實驗中會出現CT值異常甚至缺少CT值的情況?什么是CT值?在熒光定量PCR擴增實驗中,當擴增產物的熒光信號(Fluorescencesignal)達到設定的熒光閾值(FLUORESCENCEthreshold)時的所對應的擴增循環數(Cy...
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